Культивирование эмбрионов
Содержание:
Культивирование эмбрионов — лабораторный этап программы ЭКО, который начинается после оплодотворения яйцеклеток. Эмбрионы помещают в инкубаторы, где поддерживаются необходимые температура, газовый состав и другие условия, и в течение нескольких дней наблюдают за их развитием — от зиготы и стадии дробления до формирования бластоцисты.
Не каждый эмбрион достигает стадии бластоцисты: часть может остановиться в развитии на более ранних этапах по биологическим причинам. Эмбриолог оценивает темп и особенности развития эмбрионов. По результатам культивирования определяют, какие из них подходят для переноса, криоконсервации или, при наличии показаний, биопсии для ПГТ.
Культивирование эмбрионов является обязательным этапом экстракорпорального оплодотворения. Он начинается сразу после забора яйцеклеток и их оплодотворения сперматозоидами. Этот этап является очень важным, так как после него «выращенные» эмбрионы переносятся в полость матки. Наступление беременности зависит не только от качества эмбриона, но и от множества других факторов.
Что такое выращивание эмбрионов?
Культивированием эмбрионов занимается эмбриолог в специально оборудованной эмбриологической лаборатории. Именно туда врач-репродуктолог передает яйцеклетки, полученные после пункции яичников. После подтверждения оплодотворения эмбрионы продолжают культивировать в лаборатории. За их развитием наблюдают несколько дней; часто культивирование продолжают до стадии бластоцисты, которая обычно формируется на 5–6-й день, в редких случаях позже. Срок культивирования зависит от развития эмбрионов и выбранной тактики программы. При этом постоянно проводится контроль качества с целью оценки дальнейшей целесообразности культивирования. Весь процесс проходит в специальном инкубаторе, где поддерживаются строго заданные параметры среды (температура, влажность, газовый состав), которые максимально приближены к условиям в женском организме.
Бластоциста — стадия развития эмбриона, которой он обычно достигает на 5–6-й день после оплодотворения. К этому времени формируется полость, внутренняя клеточная масса, из которой в дальнейшем развивается эмбрион, и трофэктодерма — клетки, участвующие в формировании плаценты.
Не все эмбрионы достигают стадии бластоцисты одновременно: часть развивается медленнее и может сформировать ее позже.
Заведующий лабораторией эмбриологии. к.б.н.
Сергеев Сергей Александрович
Автор более 30 научных публикаций
Этапы культивирования эмбрионов
После того, как эмбриолог получает яйцеклетки, выполняется их очистка и оценка качества под микроскопом. Аналогичную подготовку проходит образец спермы, которую мужчина сдает в день пункции яичников.
На следующем этапе выполняется процесс оплодотворения. Он может проходить разными способами. Самый простой из них – смешивание яйцеклеток и сперматозоидов в специальной питательной среде. При стандартном ЭКО подготовленные сперматозоиды помещают вместе с яйцеклетками в питательную среду. Один из сперматозоидов может самостоятельно проникнуть в яйцеклетку и оплодотворить ее без микроинъекции. При различных отклонениях в спермограмме могут применяться другие способы оплодотворения, например, ИКСИ или ИМСИ. При ИКСИ эмбриолог выбирает сперматозоид с учетом его подвижности и особенностей строения и вводит непосредственно в яйцеклетку.
На следующий день после оплодотворения эмбриолог оценивает зиготу. Наличие двух пронуклеусов (2PN) — стандартный признак нормального оплодотворения: один содержит генетический материал яйцеклетки, второй — сперматозоида.
Один пронуклеус (1PN) относится к нетипичной картине оплодотворения, но такую зиготу не всегда автоматически исключают из дальнейшего наблюдения. В отдельных случаях из нее может развиться генетически полноценный эмбрион, поэтому решение принимают с учетом дальнейшего развития и возможностей дополнительной оценки.
Три пронуклеуса (3PN) обычно свидетельствуют об аномальном оплодотворении; такие зиготы для клинического использования не рекомендуются.
В актуальных рекомендациях ESHRE оценка оплодотворения после IVF/ICSI стандартизирована по времени и морфологическим признакам.
Как развивается эмбрион по дням
| День развития | Что происходит и что оценивает эмбриолог |
| 1-й день | Проверяют, произошло ли нормальное оплодотворение. Обычно оценивают наличие двух пронуклеусов — материнского и отцовского |
| 2-й день | Эмбрион находится на стадии дробления. Ориентир нормального темпа развития — около 4 клеток. Также оценивают их размер, симметрию и степень фрагментации |
| 3-й день | Деление продолжается; ориентир — около 8 клеток. Эмбриолог оценивает не только количество клеток, но и общую морфологию эмбриона |
| 4-й день | Клетки начинают плотно соединяться друг с другом — происходит компактизация и формируется морула |
| 5–6-й день | Формируется бластоциста: появляется полость, внутренняя клеточная масса, из которой развивается эмбрион, и трофэктодерма, участвующая в формировании плаценты |
| 7-й день | Некоторые эмбрионы достигают стадии бластоцисты позже. Такие бластоцисты также могут быть пригодны для криоконсервации и последующего использования |
Количество клеток и день достижения определенной стадии — ориентиры, а не единственные критерии качества. Эмбриолог оценивает развитие эмбриона в целом и его изменения в динамике.
Эмбрионы развиваются с разной скоростью. Часть из них достигает стадии бластоцисты на 5-й день, часть — на 6-й. Сам по себе 6-й день не означает, что эмбрион «плохой» или непригоден для переноса и криоконсервации.
Эмбриолог оценивает бластоцисту по совокупности признаков: степени развития, внутренней клеточной массе, трофэктодерме и другим характеристикам. Если проводилось ПГТ-А и эмбрион эуплоидный, данные исследований показывают сопоставимые результаты переноса для многих бластоцист 5-го и 6-го дня.
По результатам культивирования эмбрион может быть выбран для переноса, криоконсервации или биопсии перед ПГТ.
Что означает оценка качества эмбрионов
Эмбриолог оценивает, как эмбрион развивается: соответствует ли его стадия сроку, как делятся клетки, насколько равномерно они выглядят и есть ли признаки фрагментации.
У бластоцисты дополнительно оценивают степень ее развития, внутреннюю клеточную массу и трофэктодерму. Такая оценка помогает выбрать эмбрионы с более благоприятными лабораторными признаками, но не может гарантировать имплантацию или наступление беременности.
Условия культивирования эмбрионов
В эмбриологической лаборатории создают и постоянно контролируют условия, необходимые для развития эмбрионов вне организма: температуру, газовый состав, параметры культуральной среды и качество воздуха.
Стабильность этих условий и контроль лабораторных процессов имеют большое значение на всех этапах культивирования. Задача лаборатории — обеспечить максимально подходящую и безопасную среду для раннего развития эмбрионов.
В эмбриологической лаборатории Центра «Фертимед» поддерживается многоступенчатая система контроля условий культивирования. Воздух проходит очистку через HEPA-фильтры H14, работа с эмбрионами вне инкубаторов проводится в ламинарных зонах, а температура, газовый состав, pH среды, влажность, давление и уровень летучих органических соединений контролируются круглосуточно системой мониторинга OCTAX Log&Guard. При отклонении критических параметров система автоматически уведомляет эмбриологов.
Продленное культивирование позволяет наблюдать развитие эмбрионов до 5–6-го дня и оценить, какие из них достигают стадии бластоцисты. Эмбрионы, дошедшие до этой стадии, в среднем имеют более высокий потенциал имплантации, поэтому перенос бластоцисты позволяет точнее выбрать эмбрион для переноса.
При этом культивирование не улучшает качество самого эмбриона: оно показывает его способность продолжать развитие в лабораторных условиях. Не все оплодотворившиеся яйцеклетки формируют бластоцисты, и заранее точно предсказать это невозможно.
Тактику культивирования выбирают с учетом количества и развития эмбрионов, истории лечения и возможностей эмбриологической лаборатории.
Культивирование в программе ЭКО
Культивирование начинается после оплодотворения яйцеклеток и является частью эмбриологического этапа программы ЭКО. Эмбрионы несколько дней развиваются в контролируемых условиях лаборатории под наблюдением эмбриологов.
Продолжительность культивирования зависит от развития эмбрионов и выбранной тактики. Чаще всего их наблюдают до стадии бластоцисты, после чего эмбрион может быть выбран для переноса, криоконсервации или биопсии перед ПГТ.
Почему эмбрион может перестать развиваться
Не каждый эмбрион продолжает развитие до стадии бластоцисты. Остановка может быть связана с хромосомными нарушениями, особенностями яйцеклетки или сперматозоида, а также другими биологическими факторами, влияющими на развитие эмбриона.
По одному случаю обычно невозможно точно определить причину остановки. Если такая ситуация повторяется в нескольких программах, врач и эмбриолог оценивают результаты предыдущих циклов и решают, требуется ли дополнительное обследование или изменение тактики.
Кто оценивает развитие эмбрионов
Развитие эмбрионов оценивают специалисты эмбриологической лаборатории. Они наблюдают за темпом развития, стадией эмбриона и его морфологическими характеристиками по принятым лабораторным критериям.
Результаты эмбриологической оценки учитываются при выборе эмбриона для переноса, криоконсервации или других лабораторных этапов программы. Клиническую тактику репродуктолог определяет вместе с эмбриологом с учетом результатов всей программы ЭКО.
Показания для культивирования эмбрионов
Культивирование эмбрионов возможно только в протоколах ЭКО, поэтому отдельных показаний к этому этапу не существует. Если говорить о экстракорпоральном оплодотворении, то его применяют при разных видах женского бесплодия, которое может быть связано с:
- Маточным фактором (операции, аномалии развития матки и другие причины, по которым невозможно наступление беременности естественным путем).
- Трубным фактором (нарушение проходимости или полное отсутствие маточных труб).
- Эндокринным фактором (гормональные нарушения, которые влияют на естественное наступление беременности).
Также ЭКО может применяться и при мужском бесплодии, которое обычно связано с нарушением образования сперматозоидов или с нарушением проходимости семявыносящих путей. Наконец, экстракорпоральное оплодотворение может оказаться необходимым при идиопатическом бесплодии, когда точные причины бесплодия выявить не удается.
Обычно рекомендуется обращаться к врачу в тех случаях, когда беременность не наступает в течение года (для пар в возрасте до 35 лет) или в течение 6 месяцев (для пар старше 35 лет).
Полный перечень показаний к ЭКО и другим методам вспомогательных репродуктивных технологий изложен в приказе Министерства здравоохранения 803Н.
Противопоказания
Отдельных противопоказаний именно к лабораторному этапу культивирования нет. Возможность проведения программы ЭКО оценивает врач до начала лечения с учетом состояния здоровья женщины, сопутствующих заболеваний и действующих медицинских требований.
Преимущества технологии культивирования эмбрионов при ЭКО
Сама по себе возможность «выращивать» новый организм в искусственных условиях уже является большим достижением. Она позволяет создать оптимальные условия, которые будут поддерживаться в течение нужного времени, и при этом исключить воздействие неблагоприятных факторов, которые могут повлиять на развитие эмбрионов.
Кроме того, появляется возможность оценивать качество яйцеклеток и эмбрионов, выбирать с более благоприятными морфологическими характеристиками из них , повышая тем самым шансы на успешную беременность и рождение здоровых детей. Искусственные условия никак не влияют на развитие эмбрионов, а, наоборот, снижают вероятность развития различных патологий. Эмбрионы, которые по результатам лабораторной оценки подходят для дальнейшего использования и не переносятся в текущем цикле, могут быть заморожены и сохранены для последующего криопереноса.
Стоимость услуг
-
Программы ЭКОНазвание услугиНоменклатураВремяСтоимостьназваниеКультивирование эмбрионов - первый день
Код: A11.20.028.009номенклатураКультивирование эмбрионов - первый день
Код: A11.20.028.00968 000 руб.названиеКультивирование эмбрионов 2-5 день
Код: A11.20.028.010номенклатураКультивирование эмбрионов 2-5 день
Код: A11.20.028.01050 000 руб.названиеКультивирование эмбрионов с 3 по 5 день
Код: A11.20.028.011номенклатураКультивирование эмбрионов с 3 по 5 день
Код: A11.20.028.01133 000 руб.
Что означают сроки культивирования в прайсе
Стоимость культивирования зависит от того, сколько дней эмбрионы находятся в лаборатории и какая программа проводится.
| Позиция | Что означает |
| Культивирование, 1-й день | Первый этап после оплодотворения, когда эмбриологи оценивают его результат и дальнейшее развитие. Этот этап тарифицируется отдельно, поскольку дальнейшее культивирование требуется не во всех случаях |
| Культивирование, 2–5-й день | Продолжение культивирования после подтвержденного оплодотворения — обычно до стадии бластоцисты. Используется при стандартном полном цикле культивирования |
| Культивирование, 3–5-й день | Применяется, в частности, в программах накопления эмбрионов. Эмбрионы, ранее замороженные на 2-й день развития, размораживают и продолжают культивировать до стадии бластоцисты |
Такое разделение позволяет оплачивать именно те этапы культивирования, которые фактически проводятся в конкретной программе.
Акции
Отзывы
Записаться на прием к репродуктологу в клинику репродукции и генетики «ФертиМед» в Москве
В центре репродукции и генетики «ФертиМед» в Москве работают опытные врачи-репродуктологи и эмбриологи, которые владеют современными видами ВРТ, в том числе, передовыми методиками культивирования эмбрионов. У нас имеется собственная эмбриологическая лаборатория со всем необходимым оборудованием. Все наши пациенты могут рассчитывать на профессиональный подход, внимательное отношение со стороны медицинского персонала и высокий уровень оказания медицинской помощи.
Вопрос-ответ
Да, возраст женщины — один из важных факторов. С возрастом увеличивается доля яйцеклеток с хромосомными нарушениями, поэтому в среднем снижается вероятность получить хромосомно нормальный эмбрион.
При этом возраст не позволяет заранее определить судьбу конкретного эмбриона. Морфологически хорошая бластоциста может иметь хромосомные изменения, а оценить их по внешнему виду невозможно.
Даже эмбрионы, полученные в одной программе ЭКО, биологически не одинаковы. Каждая яйцеклетка и каждый сперматозоид имеют свои особенности, поэтому после оплодотворения эмбрионы могут делиться с разной скоростью, отличаться по морфологии и достигать стадии бластоцисты в разные дни.
Различия между эмбрионами одного цикла — обычное явление и сами по себе не указывают на проблему с проведением программы.
На стадии дробления между клетками эмбриона могут появляться небольшие фрагменты цитоплазмы. Эмбриолог оценивает их количество вместе с числом и размером клеток, темпом деления и другими признаками.
Выраженная фрагментация может быть менее благоприятным морфологическим признаком, но сама по себе не позволяет определить хромосомный набор эмбриона и не является единственным критерием его дальнейших перспектив.
Да, перенос эмбриона на стадии дробления возможен. Однако сегодня во многих программах культивирование продолжают до стадии бластоцисты, поскольку дополнительные дни наблюдения дают больше информации о дальнейшем развитии эмбрионов.
Перенос на 3-й день может использоваться в отдельных ситуациях. При этом нельзя считать, что ранний перенос обязательно поможет эмбриону, который не смог бы продолжить развитие до бластоцисты в лаборатории.
Культивирование не является способом «лечения» или улучшения самого эмбриона. Задача лаборатории — создать стабильные условия, в которых он может реализовать свой потенциал развития.
Температура, газовый состав, культуральная среда и другие лабораторные параметры имеют большое значение, но они не могут исправить хромосомные нарушения или другие исходные биологические особенности эмбриона.
Это нормальная часть биологического процесса. Не каждая полученная яйцеклетка оказывается зрелой, не каждая зрелая яйцеклетка оплодотворяется и не каждый эмбрион продолжает развитие до стадии бластоцисты.
Поэтому количество эмбрионов постепенно уменьшается на разных этапах программы. Насколько выраженным будет это снижение, заранее точно предсказать нельзя.
Так оценивают бластоцисты. Цифра показывает стадию их развития: насколько сформировалась внутренняя полость, увеличился объем бластоцисты и начался ли выход из оболочки. Первая буква отражает состояние внутренней клеточной массы, из которой развивается эмбрион, вторая — трофэктодермы, участвующей в формировании плаценты.
Например, 4AA — это бластоциста на определенной стадии развития с высокими морфологическими оценками обеих клеточных структур. Такая классификация помогает эмбриологу сравнивать эмбрионы между собой, но не показывает их хромосомный набор и не гарантирует имплантацию.
Лицензия на осуществление медицинской деятельности
Контакты
Москва, улица 3-я Парковая, дом 12 (филиал)
Пн-Сб: 09:00–20:00
Вс: 09:00–18:00
Как добраться?
Из метро Измайловская выход №1 направо, затем налево на улицу 3-я Парковая, мимо социальной аптеки пересекаем Заводской проезд, напротив IQ Denta справа вход в наш центр.
Москва, Елоховский пр-д. д.3 стр.2
Пн-Сб: 09:00–20:00
Вс: 09:00–18:00
Как добраться?М.Бауманская. Из метро направо. Перейти через дорогу, пройти через Галерею Елоховского Пассажа. На перекрестке перейти через дорогу к Елоховскому собору и двигаться по ул. Нижняя Красносельская до первого проезда. Свернуть налево в Елоховский проезд.
